【植物】植物组织培养基母液配制有哪些?


植物组织培养(planttissueculture)是指植物的任何器官、组织或细胞, 在人工预知的控制条件下, 放在含有营养物质和植物生长调节物质等组成的培养基中, 使其生长、分化形成完整植株的过程 。 植物组织培养具有取材少, 培养材料经济;人为控制培养条件, 不受自然条件影响;生长周期短, 养殖率高;管理方便, 利于自动化控制等特点 。 因而被广泛应用于各种植物的快速养殖之中 。
培养基母液, 也叫浓缩贮备液 。 它是以培养基配方配制成的高倍的浓缩液, 不同组分母液, 它的浓缩倍数不同, 一般最低为10倍, 高的有50倍、100倍、200倍, 甚至1000倍 。 母液是一个方法比较简便、用量比较准确且被广泛采用的配制方法 。 本文就如何掌握培养基母液配制的操作要领作一阐述, 以供参考 。
以MS培养基为例, 其母液的配制包括大量元素、微量元素、铁盐、维生素、氨基酸、植物生长调节物质和有机附加物等种类 。
按规定用量,称取所需的各种药品, 在配制时为减少工作量, 可以把几种药品(如大量元素或微量元素)配在同一母液中(见表1) 。

【植物】植物组织培养基母液配制有哪些?

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但由于各种药品的混合, 可能发生反应, 生成沉淀物, 以致母液失效 。 为避免类似现象发生, 在大量元素、微量元素和维生素及氨基酸的母液配制时, 可采用如下2种做法加以解决:①将要配在同一母液的大量元素、微量元素和维生素及氨基酸等化合物, 按“表1”所列药品的先后顺序溶解药品, 待前一种药品完全溶解后再加入后一种化学药品, 以此类推;②使每种成份分别完全溶解, 再把它们彼此混合 。
2、铁盐母液的配制
铁盐的成份含硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)和乙二胺四乙酸二钠(Na2-EDTA).这两种化合物的溶解和混合较为严格, 必须按如下方法配制, 否则将会产生沉淀.该方法是:分别溶解FeSO4·7H2O和Na2-EDTA, 加热并不断搅拌, 使之完全溶解, 冷却, 将2种溶液混合, 调PH至5.5, 用蒸溜水加至所需容积, 棕色瓶保存于冰箱之中 。
3、植物生长调节物质母液的配制
植物生长调节物质是培养基的重要组分之一, 一般是植物激素类物质, 如生长素类的IAA、IBA、NAA, 赤霉素类的GA3, 细胞分裂素类的2, 4-D、KT和6-BA等.由于大多数生长调节物质难溶于水, 因此配制方法也各不相同:①IAA, IBA和GA3先用少量95%酒精溶解, 再加水定容, 摇匀后贮于试剂瓶中、贴上标签后, 存放在冰箱中;②NAA可用热水或少量95%酒精溶解, 再加水定容至所需容积;③2, 4-D可溶于少许1mol·L-1的NaOH溶液中, 然后加水定容;④KT和6-BA可用少量1mol·L-1的HCl溶解, 再加水定容;⑤玉米素先溶于少量95%酒精中, 然后加水定容 。
植物生长调节物质浓度通常用ppm(mg·ml-1)和mol·L-1表示, 在配制母液时, 常以ppm较为方便, 一般配制成0.5ppm的母液, 这个浓度既便于计算, 也可避免冷藏时形成结晶.
4、有机附加物母液的配制
在植物组织培养时, 培养基中往往要加入一些有机附加物, 如椰子汁, 以促进组织培养活性 。 由于椰子汁的活性成分是耐热的, 在配制时, 要先把由果实中采集到的汁液加热煮沸以除去其中的蛋白质, 过滤, 然后置塑料瓶中贮存于的-200c的低温冰箱内 。
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