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【播种】无菌播种

种植知识 播种


无菌播种（一）实践目的

学习利用植物种子的胚轴进行愈伤组织培养的方法， 主要是种子的无菌接种技术 。

（二）实践地点和时间

植物组培室、建议4学时

（三）实践用具与材料

超净工作台、手术剪、枪状镊、酒精灯、酒精瓶、纱布、高压灭菌锅、电子天平、盛物篮、植物种子、70%酒精、0.1%升汞、zt、2,4—d、大量元素、微量元素、琼脂、蔗糖

（四）实践内容

1、培养基制备

配制ms培养基：用大量元素、微量元素、维生素、铁盐配制， 不加植物生长物质 。

每升培养基加入30/l蔗糖、8g琼脂， 将ph值调节到5.8 。

2、高压灭菌

培养基入高压锅1.11-1.12pa下稳压灭菌23分钟， 制备无菌水， 同样高压灭菌30分钟， 灭菌时将接种器械和纱布等放入高压锅一同灭菌 。

3、无菌苗的制备

选择健康饱满的种子， 流水下清洗干净， 置超净工作台上 。 无菌水冲洗2-3次后， 视材料情况， （较老较硬的种子）可剥离种皮后0.1%升汞灭菌， 也可以（较嫩较软的种子）先灭菌后再用器械无菌剥离种皮 。

4、无菌播种

剥离种皮的种子用无菌水2-3次冲洗后， 接种到已制备的ms培养基中， 每瓶培养基接种一粒 。 做好标记， 置于培养室光下培养， 以后一周随时观察生长状况 。

5、清洁整理

清洁整理工作台和组培室， 并将器械等工具清洗整理好以备下次实训使用 。

（五）作业

写出下胚轴愈伤组织培养实践报告， 并写明下胚轴愈伤组织培养的操作要领

（六）评分标准

无菌播种操作正确， 成活率高， 污染率小 。
【【播种】无菌播种】

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