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【蓝莓】蓝莓组培技术

种植知识 蓝莓


蓝莓组培技术蓝莓组培
一、实验室设计

1.准备室:(1)进行药品的保存、配置、消毒、分装等 。 (2)器具的洗涤、干燥、消毒 。 (3)生理生化指标的测定等 。

2.接种室：进行材料的接种，内置超净工作台或接种箱 。 外设缓冲间-放置拖鞋、工作服、工作帽等 。

3.培养室：植物材料的无菌培养，室内主要有培养架和控制温度及光照的设备 。

4.细胞学观察实验室：进行培养材料的组织学、细胞学、观察照相等 。

二、常用设备和器材

1.高压蒸气灭菌锅：用于培养基、蒸馏水和接种器械的灭菌消毒 。

2.超菌工作台：用于培养物的无菌操作 。 （由鼓风机、滤板、操作台、紫外灯和照明灯组成）

3.接种工具：包括双筒实体显微镜、镊子、剪刀、解剖刀、洒精灯等 。

4.培养设备：包括空调机、定时器、温度控制器、增湿机或去湿机、培养架、摇床或旋转床、日光灯、光照培养箱等 。

5.化学实验及分析设备：包括天平、酸度计、蒸馏水器、烘箱或玻璃仪器烘干器、电炉、药品柜、冰箱、晾干架等

高压灭菌锅手提式灭菌锅培养箱超净工作台烘干箱电子天秤

三、玻璃器皿的选择和清洗

1.玻璃器皿的选择

*试管-适合于用少量培养基及试验各种不同配方时选用 。

*三角锥瓶-适用于各种培养（如固体培养、液体培养、大规模培养或一般培养） 。

*L形管和T形管-为专用的旋转式液体培养试管 。

*培养皿-适于作单细胞的固体平板培养、胚和花药培养和无菌发芽 。

*角形培养瓶和圆形培养瓶-适用于液体培养用，如单细胞和原生质体的浅层培养 。

*果酱瓶-常用作试管苗大量繁殖用的培养瓶 。

2.玻璃器皿的清洗

（1）清洗玻璃器皿用的洗涤剂有肥皂、洗洁精、洗衣粉、和铬酸钾洗涤液 。

（2）清洗时先将器皿中的残渣除去，用清水洗净，再用热的肥皂水或洗洁精洗净，清水冲洗干净后用蒸馏水冲洗一次，干后备用 。

（3）洗净的玻璃器皿应透明发亮、内外壁水膜均匀，不挂水珠 。

四、影响植物组培的因素

1.植物因素：(1)基因型，(2)植物年龄，(3)组织和器官的年龄，(4)植物的生理状态，(5)取材年份及生长条件，(6)取材部位及大小 。

2.培养基因素：无机盐、有机化合物、植物激素、天然提取物、琼脂、PH值、渗透压、活性炭 。 植物组织培养的成功与否，除了培养材料本身的因素外，很大程度上取决于对培养基的选择 。 培养基的种类、成份等直接影响培养材料的生长发育 。 故应根据培养材料的种类和部位，选取适宜的培养基 。

3.外植体的选择和灭菌:不同品种、不同器官之间的分化能力有差别，且组织培养是建立在无菌操作基础之上的专门技术，因此在进行植物组织培养时，必须选择合适的外植体进行灭菌操作，以确保组织培养工作的顺利进行 。

4.环境因素：(1)光照：包括光强、光质、光周期，(2)温度，(3)湿度，(4)气体 。

五、培养基的主要成分及制作程序

（一）、培养基的主要成分：

1.无机盐：(1)大量元素：C..Cl 。 (2)微量元素.B.Na 。 (3)水：培养基95%是水，应使用蒸馏水、双蒸水或使用去离子水,水应放在塑料容器中 。

2.有机化合物：(1)糖(碳源和能源)，(2)维生素类：有维生素b1(盐酸硫胺素)、维生素b6(盐酸砒哆醇)、生物素、烟酸、叶酸等，(3)氨基酸类(有机氮源) 。

3.植物激素（生长调节物质）：

（1）生长素：主要包括IAA（吲哚乙酸）、NAA（萘乙酸）、2,4-D（2，4-二氯苯氧乙酸）、IBA（吲哚丁酸）；它们的主要作用是诱导愈伤组织的形成、胚状体的产生以及试管苗的生根，更重要的是配合一定比例的细胞分裂素诱导腋芽及不定芽的产生；作用的强弱顺序为：2，4-D>NAA>IBA>IAA 。

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