麝香百合组培快繁技术百合是世界上著名的切花品种之一,靠常规的小鳞茎分株方法繁殖,繁殖系数较低,1株百合每年只能得到1~3个小鳞茎[1] 。 有些种类可用鳞片扦插繁殖,但往往容易腐烂 。 另外,百合长期靠营养繁殖,容易感染病毒病,而影响百合品质[2] 。 组织培养快速繁殖技术,能够迅速去除病毒和更新品种,具有较高的经济价值和开发潜力,因而得到广泛的应用 。 近年来,很多花卉研究者进行了百合的组织培养繁殖研究,所选的外植体有珠芽、幼茎段、叶片、鳞片等[36],主要侧重于不同外植体对百合成苗和脱毒效果的研究,而关于利用组培苗叶片基部进行快速繁殖和结鳞茎的研究,报道较少[7] 。 本试验以组培苗叶片基部为材料,对影响百合成苗和结鳞茎的两类主要激素进行了系统研究,省去了对外植体消毒处理的过程,减少了污染机率,为将来大规模生产百合小苗和鳞球茎在理论和实践上提供参考依据 。
1材料与方法
1.1材料
采用的百合品种为麝香百合(LiliumlongiflornmThumb),英文名字为Easterlily 。
1.2方法
取百合鳞片经消毒后,接种于MS培养基上,诱导丛芽体,丛芽体继代扩增后,剥取丛芽叶片基部进行处理 。
1.2.16BA和NAA处理以MS为基本培养基,设计系列浓度的6BA和NAA处理组合,6BA(mg/L)为:0,05,10,20;NAA(mg/L)为:0,01,02,04 。 共16个处理组合,代号分别为:D11、D12至D44 。 每个处理组合接种3瓶,每瓶接10个叶片基部,长度约为1cm 。 2个月后观察统计,生根率以长根植株占成苗植株的百分数进行统计;结鳞茎率以结鳞茎植株占成苗植株的百分数进行统计 。
1.2.2培养条件百合适宜的培养温度为22~25℃,光照强度为1000~1500lx,每日光照10~16h,相对湿度约为70% 。
2结果与分析
不同浓度激素组合对叶片成苗和结鳞茎的处理效果见表1 。
21成苗率
成苗率是指所出的苗数占接种的叶基部总数的百分数 。 随着6BA浓度的加大,成苗率呈降低趋势 。 从4个浓度的6BA看,不加6BA的处理(D11、D12、D13、D14)成苗率最高,平均值为7625%,说明6BA对成苗有抑制作用 。 而适量的NAA对成苗有一定的促进作用,在这16个处理中,以D12处理成苗率最高 。
22增殖系数
组培百合的基本目标之一是在短时间内大量繁殖小苗和球茎,所以提高增殖系数,可以在短时间内获得更多的小苗或球茎 。 综合这16个处理,以D22和D43处理增殖系数最高,分别为:17和20;其次为D12、D24和D34,均为16 。
23结鳞茎率和鳞茎直径
结鳞茎率以不加6BA的为最高,随6BA浓度加大,结鳞茎率下降;鳞茎直径也有类似的结果 。 表明6BA对结鳞茎率和鳞茎直径有抑制作用 。
24株高和生根率
株高随着6BA浓度的加大而降低,从17cm降到06cm;生根率以不加6BA的为最高,平均值为905%,加大6BA浓度明显抑制百合生根 。 这说明NAA对株高和生根的促进作用,随着6BA浓度加大被抵消一部分或完全被抑制 。
25小苗的栽培和处理
对于苗高3~4cm的已生根带有鳞茎的小苗,可打开瓶口炼苗3~5d,然后移入沙∶土(1∶1)的基质中,保持温度15~25℃,湿度70%以上,50%自然光照,可得到较高成活率 。 所用沙土最好是经过灭菌的,如果用未灭菌的沙土,小苗茎部容易受细菌和霉菌的侵染而腐烂,影响成活率;用高温灭菌的沙土混合物,小苗不容易得病,长势较未灭菌的健壮,且成活率较高 。 对处于芽苗阶段的小苗,可继代至MS+NAA003mg/L的培养基中,促进其生长;对没有生根的小苗可继代至1/2MS+活性炭5%的生根培养基中,进行生根培养,然后再进行移栽 。
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