trizol法提取rna原理
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trizol法提取rna原理:在匀质化或溶解样品中,Trizol试剂可保持RNA的完整性,同时能破坏细胞及溶解细胞成分 。加入氯仿离心后,裂解液分层成水相和有机相 。RNA存在于水相中 。水相转移后,RNA通过异丙醇沉淀回收 。移去水相后,用乙醇可从中间相沉淀得到DNA,加入异丙醇沉淀可从有机相得到蛋白质 。
Trizol是一种总RNA抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速裂解细胞,抑制细胞释放出的核酸酶活性 。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA 。RNA的碱基配对规则基本和DNA相同,不过除了A-U、G-C配对外,G-U也可以配对 。在细胞中,根据结构功能的不同,RNA主要分三类,即tRNA(转运RNA),rRNA(核糖体RNA),mRNA(信使RNA) 。mRNA是合成蛋白质的模板,内容按照细胞核中的DNA所转录;tRNA是mRNA上碱基序列(即遗传密码子)的识别者和氨基酸的转运者;rRNA是组成核糖体的组分,是蛋白质合成的工作场所 。
【trizol法提取rna原理】
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