革兰氏染色注意事项

【革兰氏染色注意事项】
1、选用活跃生长期菌种染色 , 老龄的革兰氏阳性细菌会被染成红色而造成假阴性 。
2、涂片不宜过厚 , 以免脱色不完全造成假阳性 。
3、脱色是革兰氏染色是否成功的关键 , 脱色不够造成假阳性 , 脱色过度造成假阴性 。
革兰氏染色法:1884年由丹麦病理学家C.Gram所创立 。革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G-)两大类 , 是细菌学上最常用的鉴别染色法 。该染色法所以能将细菌分为G+菌和G-菌 , 是由这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所决定的 。G-菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质 , 而且肽聚糖层较薄、交联度低 , 故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质 , 增加了细胞壁的通透性 , 使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出 , 结果细菌就被脱色 , 再经蕃红复染后就成红色 。G+菌细胞壁中肽聚糖层厚且交联度高 , 类脂质含量少 , 经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小 , 通透性降低 , 因此细菌仍保留初染时的颜色 。

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