微生物培养基 微生物培养基配制与灭菌方法及步骤
微生物培养基是微生物生长、繁殖和代谢的混合营养物质。由于微生物的营养类型不同，对营养物质的要求不同，研究目的不同，所以培养基种类繁多，使用的原料也不同。但从营养角度来说，微生物培养基一般含有微生物必需的碳源、氮源、无机盐、生长素和水。此外，培养基还应具有合适的pH值、一定的缓冲容量、一定的氧化还原电位和合适的渗透压。为了满足研究的具体要求，需要对培养基进行制备和灭菌，那么微生物培养基如何制备和灭菌呢？
1.准备溶液
向容器中加入一部分所需量的水，根据培养基的配方称量各种原料，加入以溶解它们，最后补足所需的水。蛋白胨、肉膏等物质需要加热溶解，待所有原料溶解后，再加入加热蒸发的水进行补足。
制备固体培养基时，将制备好的液体培养基煮沸，然后加入称好的琼脂，继续加热至完全融化，并不断搅拌，以免烧坏琼脂糊的底部。
2.调节酸碱度
用pH试纸(或pH电位器、氢离子浓度比色计)测试培养基的pH值。如果不符合要求，可以用10%盐酸或10%氢氧化钠调节，直到达到配方要求的酸碱度。
3.过滤（液体、气体、光、声音等）
趁热用滤纸、纱布或棉花过滤制备的培养基。用纱布过滤时，最好折叠成六层。用滤纸过滤时，可以将滤纸折叠成瓦棱柱状，铺在漏斗上进行过滤。
4.子包装
过滤后的培养基应分开包装。如果你想制作斜面培养基，你必须把培养基分成试管。如果你想制作平板培养基或液体或半固体培养基，你必须把培养基装在锥形瓶中。包装时，一只手松开弹簧夹，让培养基流出，另一只手握住几个试管或锥形瓶，依次拿起培养基。包装时注意不要让培养基粘在管口或瓶口，以免浸泡棉条造成杂菌污染。试管中培养基的量取决于试管和锥形瓶的大小和需要。一般在制作斜面培养基时，每根15×150 mm试管约含3 ~ 4 ml(试管高度的1/4 ~ 1/3)。如果制作深层培养基，每根20×220 mm试管含12 ~ 15 ml左右。每个锥形瓶中填充的介质通常是其体积的一半。
5.添加棉塞
分装后，需要用棉塞塞住管口或瓶口。棉塞的主要用途是过滤空气体，避免污染。棉塞应采用普通的新鲜干棉，不要使用脱脂棉，以免因脱脂棉吸水而导致棉塞无法使用。制作棉塞时，应根据棉塞的大小，将棉花铺成适当的厚度，将一块手掌大小的棉花放入左拇指和食指形成的圆孔中，右手食指插入棉塞中间，同时左手食指和拇指稍相扣合，形成长杆状棉塞。卫生棉条制作完成后，应迅速塞入管口或瓶口，卫生棉条应紧贴内壁，不留任何缝隙，防止空气中的空微生物沿褶皱侵入。棉塞不能太紧或太松。便携式卫生棉条、管、瓶塞好后不要掉下来是合适的。棉塞的2/3应该在管子或瓶子里，上端露出一点棉花，便于拔出。试管和塞有卫生棉条的圆锥形瓶子要用厚纸盖好，用绳子捆住消毒。
6.制作斜面培养基和平板培养基
培养基灭菌后，如制作斜面培养基和平板培养基，必须在培养基未凝固的情况下进行。
(1)制作斜面培养基。在实验台上放一根长0.5 ~ 1米，厚约1厘米的木条，将试管的头部枕在木条上，使试管内的培养基自然倾斜，凝固后成为倾斜培养基。
【微生物培养基 微生物培养基配制与灭菌方法及步骤】(2)制作平板培养基。将装有刚灭菌培养基的锥形瓶和培养皿放在实验台上，点亮酒精灯，右手托住锥形瓶底部，左手取下棉塞，将瓶口在酒精灯上轻轻灼烧，左手打开培养皿盖，右手快速将培养基倒入培养皿中，每皿约10 ml，以盖住皿底。铺好培养基后，放置15分钟左右。培养基凝固后，将五个培养皿叠放，倒置，平放在培养箱中，24小时后检查。如果培养基末端有杂菌，可以用来培养微生物。
推荐阅读
- 鼢鼠胃肠道微生物区系研究获进展
- 西安市中医医院连夜为重点人群配制新冠肺炎预防中药
- 构建迄今为止最全面的全球微生物基因目录 复旦大学研究成果登上《自然》主刊
- “微生物资源、基因、大数据与未来人类健康” 这场科技论坛干货十足！
- 中国食药用菌产业发展科技论坛在深圳召开 微生物安全与健康研究院揭牌
- 净菜加工过程中微生物污染怎么解决？
- 运动能抗炎实锤！运动让体内产生类“大麻”物质，改变肠道微生物，减少炎症
- 解决肉制品加工生产微生物污染的方法有哪些？
- 13批次食品抽检不合格!! 食品生产微生物超标如何解决?
- 长治市妇幼开展“2021年提高抗微生物药物认识周”活动