嗜酸乳杆菌的作用 青春双歧杆菌和嗜酸乳杆菌对实验性结肠炎恢复期治疗作用
练习刘光辉哲鲁方根
目的通过建立DSS诱导的UC恢复期小鼠模型,探讨青春双歧杆菌和嗜酸乳杆菌在维持UC缓解中的作用。方法将50只6 ~ 8周龄雌性BABL/ c小鼠随机分为5组:正常对照组、嗜酸乳杆菌组、青春双歧杆菌组、柳氮磺吡啶组和生理盐水对照组,每组10只。除正常对照组外,其余小鼠均给予2.5% DSS自由饮水和SASP灌肠治疗7d。观察小鼠一般情况及大便隐血情况,计算疾病活动指数。实验结束时,处死动物,测量整个结肠长度,并进行组织病理学检查和组织学评分。结果青春双歧杆菌和嗜酸乳酸杆菌能维持实验性结肠炎的缓解,从第一个IOd开始,DAI评分明显低于生理盐水对照组,模型进而考察青春双歧杆菌的疗效。UC上的嗜酸菌。方法将50只6 ~ 8周龄无特定病原体的BALB/c小鼠随机分为5组:正常对照组、嗜酸乳杆菌治疗组、青春乳杆菌治疗组、SASP治疗组、NS对照组。除正常对照组小鼠外,用2.5% DSS水诱导40只BABL/c小鼠7天自由饮水和10天蒸馏水。小鼠每天灌胃一次,给予0.2毫升嗜酸B.adolescentis/乳杆菌/SASP乳杆菌/生理盐水,持续17天,而正常对照组不予治疗。每天记录动物体重、粪便性状和出血量,然后计算疾病活动指数。动物在第18天早上被杀死。分离整个结肠以检查长度和苏木精和伊红染色,并测量组织学评分。结果青春拟杆菌和嗜酸乳杆菌能缓解DSS诱导小鼠的病情。用病原体治疗的小鼠DAI和h istology评分远低于未用病原体治疗的小鼠,是一种慢性复发性疾病,其病因和复发机制尚不清楚,但发现与肠道菌群密切相关。病原菌的过度繁殖会改变肠道抗原谱,从而引发炎症反应,黏膜的炎症损伤为病原菌进入体内引起复发提供了条件。因此,通过补充肠道益生菌抑制和/或杀灭病原菌,重建肠道微生态环境可能有利于UC的持续缓解。
目前常用的化学诱导和免疫诱导的动物研究模型多为急性炎症,不能真实反映疾病的全过程。本研究通过饮用7dDSS建立急性期U C模型,观察急性期晚期恢复期小鼠模型10天。综合观察疾病活动度和结肠组织损伤情况,分析青春双歧杆菌和嗜酸乳杆菌对小鼠模型疾病发展和转归的影响,评价青春双歧杆菌和嗜酸乳杆菌对DSS诱导的UC恢复期动物模型的治疗价值。
1.材料和方法
1.1材料
DSS的分子量为5000,购自适马公司,用浓度为2.5%的生理盐水配制。SASP由上海达夫制药有限公司生产,粉碎后用生理盐水稀释至20毫克/毫升。青春双歧杆菌BF0624和嗜酸乳杆菌LT0637由湖南康哲中南医学研究有限公司提供,培养基离心后用生理盐水稀释至1×l 09 CF U/ml。
1.2方法
1.2.1实验动物和组
【嗜酸乳杆菌的作用 青春双歧杆菌和嗜酸乳杆菌对实验性结肠炎恢复期治疗作用】Balb/ c小鼠,SPF级,雌性,6-8周龄,体重g,随机分为5组,每组10只,分组情况如下:正常组:正常饮食和饮水;生理盐水对照组:DSS7d造模+无菌生理盐水灌肠17d15-氨基水杨酸组:DSS 7d造模+SASP灌肠17d青春双歧杆菌组:dss7d建模+I x 109CFU /mlB。青春期灌肠17d嗜酸乳杆菌组:DSS建模+I×l09CFU/MLL嗜酸乳杆菌灌肠。
1.2.2动物治疗
根据张艳丽的方法,通过自由饮用2。前7天用5%DSS溶液,然后继续正常饮用10天。正常组一直给予正常饮食和饮水。从实验的第一天开始,无菌生理盐水、SASP、青春芽孢杆菌菌液、嗜酸乳杆菌菌液等。灌胃,每只小鼠每天灌肠一次,0。每次2ml/ 10g,连用17天。每天测量动物体重,记录大便性状和潜血,计算DAI评分。第18天,颈椎脱位后处死小鼠,取出结肠和回肠远端,取出从肛门到盲肠末端的整个结肠和直肠。观察各组结肠和全结肠长度的大体变化。在结肠末端用预冷的无菌盐水冲洗结肠:4075-82。
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