过表达是什么意思?
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1、意思是本来基因表达是受到各种内外信号的精确调控的,一旦这种调控机制的任何一个环节出现问题就会失控 。
2、基因的表达过程就可能进入失控状态,就有可能表现为表达过度,即该基因被过度的转录、翻译,最终基因表达产物超过正常水平 。
【过表达是什么意思】3、例:从含gfp基因的载体上酶切下gfp基因 , 比如pgfp载体 , 切胶回收gfp基因片段 , 再同样酶切你的表达载体(根据你想表达的物种选择不同载体) , 把回收的gfp基因同你酶切后纯化的表达载体放到一起 , 加t4连接酶连接过夜 。 再转化大肠杆菌 。 如果只是在大肠杆菌里做原核表达 , 就直接转化蛋白表达能力强的大肠杆菌菌株 , 比如bl21 。 如果是想在植物细胞或动物细胞里表达 , 利用菌落pcr筛选出真阳性菌株 , 再扩培阳性菌株 , 抽提质粒 。 植物的话 , 一般是再转到农杆菌里 , 利用农杆菌转染植株 , 使得gfp插入植株染色体 , 表达gfp蛋白 。 动物的话 , 一般是利用病毒载体 , 直接转染细胞 。
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