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血浆如何提取，从全血提取血浆方法

小知识


血浆蛋白提取方法 血蛋白怎么提取 血液：由液体成分的血浆和悬浮于其中的血细胞组成， 合成为全血 血浆：离开血管的全血经抗凝处理后， 通过离心沉淀， 所获得的不含细胞成分的液体， 即血浆 。 血清：离体的血液凝固之后， 经血凝块聚缩释出的液体， 即血清 。 粗略的说， 血清与血浆的区别， 主要在于血清不含纤维蛋白元 。
如何提取血浆中的蛋白质 正常总蛋白（tp）
60-80g/l,白蛋白（alb）40-55g/l， 只要血生化检查提示低于这个值就可以诊断低蛋白血症 。
是否需要治疗， 要看蛋白值具体低多少， 如果只是轻度的异常， 只要加强营养一般就能恢复， 如果程度较重就要及时补充了
提取血浆有什么用处呢 血浆核酸提取实验常见问题解析
很多人在做血液来源样本DNA提取时会对样本类型概念不清楚， 所以在做核酸提取、核酸检测类的实验时， 对提取试剂的选择比较随意， 其实验结果也往往不尽如人意， 那么不同血液来源的样本有什么区别， 对核酸提取、核酸检测有什么影响呢？
一、什么是外周血， 什么是全血， 什么是血清， 什么是血浆？
新鲜的血液（也叫全血， 医学上称为外周血）加入抗凝剂（如柠檬酸钠， EDTA等， 一般医院采血都是用抗凝管采集）， 静置一段时间， 会出现分层的现象 。 上面淡黄色的半透明液体是血浆， 约占55%， 下面暗红色不透明的是红细胞， 约占45% 。 中间薄薄的一层白色物质是白细胞和血小板， 不到1% 。 红细胞、白细胞、血小板共同组成了血细胞 。
特别提示：不加抗凝剂的血液很快就会凝成血块， 在凝血块周围出现的淡黄色的透明液体是血清， 血清中不含纤维蛋白原 。
简单来说， 全血包括血浆和血细胞（红细胞、白细胞、血小板）， 血浆包括血清和纤维蛋白原 。
在选择核酸提取试剂盒时， 首先要考虑的是样本类型以及提取的核酸种类， 选择针对性强， 提取效率高的提取试剂盒 。 如果要提取血细胞中的核酸， 需要选择血细胞核酸提取试剂或全血核酸提取试剂；如果要从血清或血浆中提取游离核酸或游离肿瘤核酸则要选择血浆或血清核酸提取试剂；如果需要检测外周血中有无病毒或细菌感染， 一般也是选择血浆或血清核酸提取试剂 。 如果要提取DNA， 需要选择DNA提取试剂， 要提取RNA， 则要选择RNA提取试剂 。 如果目标基因丰度较低， 需要较多的血浆或血清进行富集提取， 则需要选择专门的血浆、血清核酸富集提取试剂 。 还有， 如果核酸检测的结果要面向临床出具检验报告， 选择的提取试剂盒要通过药监局审查， 应有药监局备案号， 这一点非常重要 。 在进行核酸提取实验时， 切不可选错了试剂盒， 否则会影响实验效果和实验进度 。 目前， 国内应用较多的血液系列核酸提取试剂主要有Qiagen、Biog等， 其血液系列核酸提取试剂均比较全面， 包括血细胞、血清、血浆、DNA、RNA、小量提取、中量富集提取等， 研究者可根据实验需要进行选择 。
二、血清血浆游离DNA提取需要多少样本量？得率多少正常？

图1 Qiagen关于cfDNA得率的数据图

图2 Biog血浆DNA提取试剂盒做血浆样本DNA提取， Q-bit测浓度无读数， PCR检测结果靶基因（CT 25左右）以及内参（CT 21左右）扩增曲线

血清、血浆样本中游离核酸含量较低， 根据Qiagen公司数据， 1ml血浆样本DNA提取得率只有7.35ng左右（图1） 。 这么低的核酸浓度， 如果直接用紫外法检测， 得出的数值并不准确， 而且多次测量的结果会变异很大 。 有些研究者提取血浆核酸后习惯于先用紫外检测浓度， 发现紫外检测不出来或浓度很低时便认为提取失败， 放弃后面进一步的实验， 其实并不可取 。 我们可以把紫外读数作为参考， 但是不能作为判断得率的唯一标准， 最好还是要做个PCR或荧光定量 。 根据Qiagen公司的实验， 血清血浆的量与提取的核酸量成正比 。 因而， 如果要提高核酸得率， 可通过增加血清或血浆的量来实现 。 一般地， 做血浆或血清核酸提取， 样本量最好在1ml以上 。 如果1ml或更大量样本得不到满意的检测结果， 则应及时考虑更换提取试剂盒 。 目前国内常用的Qiagen、Biog血浆核酸提取试剂盒核酸提取的得率都很不错， 基本上能够满足绝大多数实验的要求 。

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