秋海棠组培快繁技术一、植物
竹节秋海棠(B.President-carnot)
二、材料类别
叶片、叶柄、茎段
三、培养条件
以MS为基本培养基 。 诱导愈伤组织培养基:(1)MS+BA3——5mg/L(单位下同)+NAA0.1——0.5 。 丛生芽增殖培养基 。 (2)MS+BA1.0+NAA0.1 。 (3)MS十BA0.5十NAA0.1 。 (4)壮苗培养基:1/2MS(液体) 。 (5)诱导生根培养基:1/2MS+NAA0.2 。 上述培养基均加3.0%蔗糖、0.8%琼脂 , pH值5.8 。 培养温度(24±2)℃ , 光照不适合过强 , 有80Olx左右即可 , 光照10h/d 。
四、生长与分化情况
(一)无菌材料获得将竹节秋海棠已平展之幼嫩叶片、叶柄、茎段先用适量洗衣粉对水洗涤 , 然后用自来水反复冲洗 , 于无菌条件下用75%酒精药棉擦拭干净 , 放于饱和漂白粉溶液10分钟 , 后置于0.1%升汞溶液中消毒2分钟 , 用无菌水冲洗5——6次 , 消毒滤纸吸收干表面水分 , 叶片切成0.5cm见方小块 , 叶柄、茎段则切成约长1cm左右长条 , 均接种于培养基(1)上 。
(二)丛芽的诱导与增殖接种、培养1周后 , 叶、叶柄、茎段周围开始膨大、增厚 , 质地变硬 , 逐渐形式黄绿色愈伤组织 , 3周后渐渐分化出小芽点 , 芽点继续生长 , 约5周左右形成明显的丛生芽 。 将丛生芽切成小块 , 接种于(2)和(3)培养基上进行增殖 , 小芽丛上不断分化出很多幼芽 。 叶、叶柄、茎段在两个培养基上增殖速率基本相同 , 约4周左右继代1次 , 增殖系数可达6——9 。
(三)壮苗在进行大量增殖阶段后 , 我们停止固体培养而改为液培 , 将分化芽转接到1/2MS , 3周后 , 可发现生长健壮、个体粗壮的无根苗 。 这为以后生根、移苗出瓶 , 提高适应外界环境 , 增强抗病能力 , 提供了良好条件 , 移栽更易成活 。
(四)根的诱导将高约3cm、生长健硕的无根壮苗 , 接种到培养基(5)上 。 2周后 , 苗基部长出辐射状白色小根 , 每株生根5—7条 , 3周后 , 根伸长至1.0—1.5cm , 生根率达100% 。
(五)试管苗的移栽将培养有试管苗的三角瓶盖打开 , 在实验室通风处炼苗3d , 取出小苗 , 洗去根部残留培养基 , 种植前根部在0.2%Na2SO4溶液中滞留片刻 。 移栽到用高压灭菌消毒过的蛭石+细沙+园土(1:1:1)的混合基质中 , 地上部喷施0.1%多菌灵溶液 , 用薄膜覆盖 , 每天喷水2次 , 1周后揭膜 , 成活率在95%以上 。
【【秋海棠】秋海棠组培快繁技术】
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